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---|---|---|---|
XFp miniplate/ XFp PDL miniplate |
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- ?? 80μL? ?? ???? ?????. ????? ??? ??? ???? ????(A1, A12, H1, H12). ????? ?? ??? ???(?? ??) ??? ???.
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- ?? 100μL? ?? ???? ?????. ????? ??? ??? ???? ????(A1, B4, C3, D6). ????? ?? ??? ???(?? ??) ??? ???.
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- ??? ????? ? ???? ?? ??, ??? ??? ??? ??? 1-5?? ? ??? ??(???? ?????) ? ?? 150μL? ?? ??? ??? ????(? 250μL) ????? ?? ?? ?? ?????? ????.
- ??? ??? ? ? ?? 150μl? ?? ??? ???? ?? ? ?? ??? 250μl? ????. ?? ??? ??? ? ?? ??? ??? ???? ??? ??? ??? ?????.
- ??? ?? ?? ??????? ?? ????? ???. ???? ???? ??? ??? ??? ???????.
2.4.2 XF HS miniplate
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- ??? ???? ?? ?? ?????.
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- ? A? H? 30μL ?? ??(?? ??)? ?????. ?? ????? ?? ????.
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---|---|---|---|
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30μL | 3.0×103 ??/30μL | 1.0×105 ??/mL |
- ? ?? ?? ? ??? 30μL? ?? ???? ?????. XF HS miniplate?? ? ?? ??? ?? ??? ???? ?? ?????(?? ???? ???? ????? ?? ?? ? ??? ?? ???? ????? ???? ??? ???). ????? ? A? H?? ??? ???? ????. ? ??? ??? ???? ????? 200 x g?? 1-2? ?? ?????? ??? ??? ? ????.
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- ??? ?? ?? ??????? ?? ????? ???. ???? ???? ??? ??? ??? ???????.
2.5 XFp PDL ?? XF HS PDL miniplate ??(?? ??? ??)
XF ??? ???? ??? ??(?: T ??, ??? ??? ?)? ????? ??? ? ??? ???? ???. ?? ? ?? ??? ?? poly D-lysine(PDL)?? ?????? ???????. ????? ?? ?? ??? PDL ?? XFp ? XF HS miniplate? ?????. ?? ?????? T ??? ?? ???? ?? ?????. ?? ??? ? ?? PDL ????? 37°C non-CO2 ??????? ??? ?? ??? ? ?? ??? ?????(?? 6??).
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- ??? non-CO\2 37°C ?????? ????? ??? ?? ?????.
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?? ?? ??? ????? XF ??? ??? ?????. ?? ?? ??? ?? ??? ?? 3.2?? ?????.
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- Agilent Seahorse XF96 ?? ?? ????????? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XF24 ?? ?? ????????? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XFp ?? ?? miniplate? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XF HS miniplate? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XF ?? ?? ?????????? ?? ?? ?? ??? ????? ???
- Agilent Seahorse XFe/XF96 ?? XFp ?????? ???? ?? Cell-Tak? ??? ??? ??? ??
- Agilent Seahorse XF HS miniplate? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XFe/XF24 ??? ???? ?? Cell-Tak? ??? ??? ??? ??
- ?? ?? ??: XFe96/XF96 ??? ? Seahorse XF Real-Time ATP ??? ???
- ?? ?? ??: XF24 ??? ? ?? ??? ??? ???
- ?? ?? ??: XFp ??? ? Seahorse XFp Real-Time ATP ??? ???
- ?? ?? ??: XF HS Mini ??? ? XF Real-Time ATP ??? ???
- ?? ?? ??: HS miniplate? XF Real-Time ATP ??? ???? ?? XF HS Mini ???
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- Agilent Seahorse ??? ??? ? ???
- Agilent Seahorse ??? ??? ? ???
- Agilent Seahorse ??? ??? ? ???
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- Agilent Seahorse ??? ??? ? ???
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Agilent Cell Analysis ???? ???? ???? ?? ??? ?????.
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- ??? 400μL? XF ?????? ???? ? ?? ??? moat? ????.
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- ?? ????? ?? ??? ???? ?? ??? ?? ????? ???? ????? ?? non-CO2 37°C ?????? 45-60? ?? ?????.
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- ??? ?? ????? ???? ????? ?? non-CO2 37°C ?????? ?? ????? ?? ??? ??? ??? ?? ????.
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XF ??? ?? ??
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Seahorse XF Real-Time ATP Rate Assay ??? ?? ??? ?? XF ??? ??? ?????.???? ?? ?? ??? ??? ???? ???? XF ??? ??? ???? ???. ?? ???? ?? ??? ??? ?? ??? ?? ?? ??/???? ???? Agilent Seahorse XF ?? ? ??? ???? ??? ? ???, ?? ?? Seahorse XF Real-Time ATP Rate Assay ?? ?? ??? ??? ??????.
?? ??? ??? ???? ??? ?? XF ??? ??? ?????.???? ??/???? ?? ?? | ?? ?? | ?? | |||
---|---|---|---|---|---|
Seahorse XF DMEM ??, pH 7.4a, b/103575-100 ?? Seahorse XF RPMI ??, pH 7.4a, b/103576-100 |
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Seahorse XF DMEM ??a,b/103575-100 ?? Seahorse XF RPMI ??a,b/103576-100 | - | 97.0mL | 9.70mL |
Seahorse XF Glucose(1.0M ??)/103577-100 | 10mM | 10μL | 10mM | 1.0mL | 100μL |
Seahorse XF Pyruvate(100mM ??)/103578-100 | 1mM | 1.0mL | 100μL | ||
Seahorse XF L-Glutamine(200mM ??)/103579-100 | 2mM | 1.0mL | 100μL | ||
a XF DMEM ? RPMI ??, pH 7.4? ?? ??? pH ?? ??? XF ???? ??? ? pH? ??? ??? ????. ??? ??? ??? ?? ???? ?????. Seahorse XF DMEM ?? pH 7.4 ? RPMI ??, pH 7.4? XF24 ???? ???? ????. b ?? ??? XF ??? ??? ?? ?? ??? XF ??? ??? ?? ?? ??? XF ??? ??? ?? ?? ??? XF ??? ??? ?? ?? ??? XF ??? ??? ??. |
XF DMEM ?? pH 7.4 ?? XF RPMI ?? pH 7.4? ???? ?? ?? ??
XF Base ??(w/o Phenol Red) ?? XF RPMI(w/o Phenol Red) ??? ?? ?? ??
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3.2.1 XFp PDL miniplate
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3.2.2 XF HS PDL miniplate
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3.3.2 XF HS miniplate? ?? ?? ??
XF HS Mini ??? ?? ?? ?? ??? ?? ??? ??:- CO2 ??????? ?? ?? miniplate? ?????.
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Seahorse XF Real-Time ATP Rate Assay ??? ??? ?? | ||||
---|---|---|---|---|
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Oligomycin | 420μl | 168μL | 150μM | 75μm |
Rotenone + Antimycin A | 540μL | 216μL | 50μm | 25μm |
XF ?? ??? ??? ??? ??? ??? ?? | ||
---|---|---|
XF ?? ??? ??? ??? ???? | XF ??? ??? ??(μL) | ?? ?? ??(μM) |
Oligomycin | 630 | 100 |
FCCP | 720 | 100 |
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- ?? ?? ??? ?? ??? ?? XF ??? ??? ?? oligomycin ? ?? rotenone/antimycin A? ???? ? ?? ?? 300μL? ?????.
XF Real-Time ATP Rate Assay ??? ?? ?? - ?? ?? ?? | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|
?? ? ??? | ?? ?? | XF ??? ?? ?? | 10X[??] | [?? ?] | ||
?? A Oligomycin | 300μL | 60μL | 2700μL | 240μL | 15μm | 1.5μm |
?? B Rotenone + Antimycin A | 300μL | 60μL | 2700μL | 240μL | 5μm | 0.5μm |
XF ?? ??? ??? ??? ??? ?? ?? - XFe24/XF24? ??? ?? ?? ?? ?? | |||||
---|---|---|---|---|---|
?? ?? FCCP ?? | ??? ??? ??(μL) | ?? Oligomycin? ??(μM) | ?? FCCP? ??(μL) | 10X ?? Oligo(??) ??(μM) | 10X ?? FCCP(??) ??(μM) |
0.25 | 875 | 100 | 25 | 10 | 2.5 |
0.5 | 850 | 100 | 50 | 10 | 5.0 |
1.0 | 800 | 100 | 100 | 10 | 10 |
2.0 | 700 | 100 | 200 | 10 | 20 |
?? ??? XFp HS Mini ???? ???? ??, ??? ?? ?? ?? ??? ?? XFp HS MiniKit ??? ???? ?????.
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- Agilent Seahorse ?? ???? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XFe24 ?? ???? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XF24 ?? ???? ?? ?? ??
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- ?? ?? ??: XFp ??? ? Seahorse XF Real-Time ATP ??? ???
- ?? ?? ??: XF HS Mini ??? ? XF Real-Time ATP ??? ???
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- Agilent Seahorse ??? ??? ? ???
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Agilent Cell Analysis ???? ???? ???? ?? ??? ?????.
3.4 ?? ?? ??
3.5 ?? ?? ??
??? ??? ??? ?? A ??? B ?? ??? ?????.
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- Agilent Seahorse XF ??? ????? ??? ????. ? ???(?? A-D)? ??? ?????. ??? ??? ?? ??? ??? ?????.
- Agilent Seahorse XFp ??? ????? ??? ????. ? ???(?? A-H)? ??? ?????. ??? ??? ?? ??? ??? ?????.
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- ?? ?? 22μl? ???? ? ??? ???? ?? B? ?????.
- ??? ??? ?? ?? ??? ????? ?????. ??? ??? ??? ??, ???? ?? ?? ??? ??? ?????.
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XF Real-Time ATP Rate Assay ??? ?? ?? ? ?? - ?? ?? ?? | ||||
---|---|---|---|---|
?? ? ??? | ?? | 10X[??] | [?? ?] | |
?? A Oligomycin | 20μL | 55μL | 15μm | 1.5μm |
?? B Rotenone + Antimycin A | 22μL | 62μL | 5μm | 0.5μm |
?? ?? ??(μM) | FCCP ?? | ? | ??/??(μL) |
---|---|---|---|
Oligo / FCCP 1.0 / 1.0 | 1.0μM | A1-D6(??) | A/55 |
FCCP ?? ?? ???? ?? ?? ?? ??
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- A/D ?? ???? ??? ???? ?? ???? ????. ?? 'A'? ?? ?? ???? ??? ?? ???? ??? ????. ?? ?? ?? ?? ?? ????? ??? ??? ??? ??? ?? ???? ??? ??? ?? ?????.
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- ??? ??? ?? ?? ??? ????? ?????. ??? ??? ??? ??, ???? ?? ?? ??? ??? ?????.
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- ???? ?? ??? 50-100μL???.
- 180μL ??? ??? ???????? ? ???? ???? ?? ? 10X ??? ?? ?? ?? ?? ??.
- ?? A: 20μL
- ?? B: 22μL
- ?? C: 25μL
- ?? D: 28μL
- 500μL ??? ??? ???????? ? ???? ???? ?? ? 10X ??? ?? ?? ?? ?? ??.
- ?? A: 55μL
- ?? B: 62μL
- ?? C: 69μL
- ?? D: 75μL
- ???? ??? ??, ?? ? ?? ??? ??? ?? ?????.
- ?? ????? ?? ?? ??? ??? ? ???? ?? ??? ???? ??? ???? ????.
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- Agilent Seahorse XFe96 ?? ???? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XFe24 ?? ???? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XF24 ?? ???? ?? ?? ??
- Agilent Seahorse XFp ?? ???? ?? ?? ??
- ?? ?? ??: XFe96/XF96 ??? ? Seahorse XF Real-Time ATP ??? ???
- ?? ?? ??: XFe24 ??? ? Seahorse XF Real-Time ATP ??? ???
- XF24 ?? ?? ??: XF24 ??? ? ?? ??? ??? ???
- ?? ?? ??: XFp ??? ? Seahorse XFp Real-Time ATP ??? ???
- ?? ?? ??: XF HS Mini ??? ? XF Real-Time ATP ??? ???
- ?? ?? ??: HS miniplate? XF Real-Time ATP ??? ???? ?? XF HS Mini ???
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- Agilent Seahorse ??? ??? ? ???
- Agilent Seahorse ??? ??? ? ???
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Agilent Cell Analysis ???? ???? ???? ?? ??? ?????.
Seahorse? ?? ??? ??
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- ??? ??? ?? ?? ??? ????? ?????. ??? ??? ??? ??, ?? ???? ?? ?? ??? ??? ?????.
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- ?? ??? ??, ??? ??? ?? ??? ???? ?? ?? ???? ?? ??? ???? ?????.
- ?? ??? ?? ????, ?? ? ?? ? ??? ????? ?????? ?????.
- ????? ?? ??? ???? ?? ??? ?????.
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- ???? XFe ???? ??? ?? ?? XFe ????(???)? ???? ??? ?????. Wave ???? ?????? ?? ?? ???? ?? ?? ???? ?? ?? ??? ??? ? ????.
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- ??? ??? ??? ??? Wave Pro/Wave ????? ?? Seahorse Analytics?? ??? ?? ?? ?? ???? ???? ?? USB ??? ????? ???? ??? ??? ??? ??? ?????.
- ??? ??? ????? ???? ??? ???? ???.
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- Assay Name(??? ??) ?? Edit(??)? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ?????.
- Notes(??) ?? Edit(??)? ?? ???? ??? ??? ?? ??? ?????.
- Email Notification(??? ??) ?? Edit(??)? ?? ????? ??? ?? ??(?: ???? ????? ?? ????? ??)? ??? ??? ?? ? ??? ?? ??? ???? ???? ???. ? ??? ????? XFp ????? ??? ??? ????? ??? ???.
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Seahorse? ?? ??? ??
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XF ??? ?? ?? ????? Agilent Seahorse Analytics? ??? Seahorse Analytics? ???? XF Real-Time ATP ??? ??? ?? ??? ???? ??? ?? ?????. Wave Desktop ? Report Generator? ?? ??? ???? ?? ???? ??? ?????.
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5.2 ?? ??
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- ?? ?? ???? ?? ?? ?? ?? ??? ?? ??(?: ??? ???)? ?? OCR, ECAR, PER? ?? ? ???? ??? ???, ??? ? ?? ??? ?? ?? ?? ??? ???? ????.
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a. ??? ?? ??? ?? Standard Graphs(?? ???) > Blank View(??? ??)? ??? ? Add View(?? ??)? ?????
b. Add Widget(?? ??)? ???? Standard Graphs(?? ???) > Kinetic Graph(??? ???)? ??? ? Add Widget(?? ??)? ?????
c. Widget Editor(?? ???) ???? ?? ??? ?????.
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e. Add Widget(?? ??) +(??? ??? ?? ??)? ???? Standard Graphs(?? ???) > Kinetic Graph(??? ???)? ??? ?? Add Widget(?? ??)? ?????
f. Widget Editor(?? ???) ???? ?? ??? ?????.
- Rate(??) ???? ??? ???? ECAR? ?????
- Y1 > ??? ???? pH ?? ???? ?????
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g. back-arrow(?? ?? ???)? ???? ?? ??? ?????.
h. ?? ??? ???? ?? Views(??) ??? ???? "??? ??" ?? ?? ?? ???? ?? ??? ?? 3-dot(? 3?) ??? ?????.
i. Save as Custom View(??? ?? ??? ??)? ???? ??? ?? ?? ??(?: ??? QC ??)? ?????.
j. ??? ??? ?? ??? ??? ??? ? ??? ?? ??? QC ??? ??? ? ???? ?? ???? ?? ??? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ??? ? ????.
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1. Assay Kit Companion Analysis View(??? ?? ???? ?? ??) ? XF Cell Mito Stress Test(XF ?? ?????? ???? ??): ?? ?? ???? XF ?? ?????? ???? ?? ??? ????? ???? ?????:
- Add View(?? ??) ??? Assay Kit Companion View(??? ?? ?? ??) ??? ???? ?? ??? ?????.
- XF Cell Mito Stress Test(XF ?? ?????? ???? ??) ?? ??? ???? ??? ???? ??? ?????.
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- ??? ?? group list(?? ??)?? ??? ??/?? Add View(?? ??)? ?????.
a. Add Widget(?? ??) ??(???? ??? ????? ??)? ?????.
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?? ?? ?? | (?? ?? ??) – (?? ?? ??) |
?? ?? ??(%) | (?? ?? ??)/(?? ?? ??) × 100% |
?? ?? | (Oligomycin ?? ? ??? ?? ??) – (?? ?? ? ??? ?? ??) |
?? ?? | (ATP-?? ?? ??)/(?? ?? ??) × 100% |
2. Assay Kit Companion Analysis View(??? ?? ???? ?? ??) ? XF Substrate Oxidation Stress Test: ?? ?? ???? XF Substrate Oxidation Stress Test ??? ????? ???? ?????:
- Add View(?? ??) ??? Assay Kit Companion View(??? ?? ?? ??) ??? ???? ?? ??? ?????.
- XF Sub Ox Stress Test ?? ??? ???? ??? ???? ??? ?????.
- ?? ??? ??? ??? ???? ??? ?????. ?? ??? ??? ???? ?? ??? ?????? ?????.
- ?? ??: FCCP ?? ?? ????? ???? ?? ?? ?? ??? ??? FCCP ?? ? ?? ??? ??? ? ????. ?? ??? ???? Seahorse Analytics? ???? ?? ?? ??? ????; ?? ??? ???? ?? ? ????(?, ?? 1 ?? ??? FCCP ?? ? ? ?? ???? ?? 2 ?? ??? FCCP ?? ? ? ?? ?? ???).
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a. Add Widget(?? ??) ??(???? ??? ????? ??)? ?????.
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?? ?? XF Substrate Oxidation Stress Test ??? ???? ??? ?? ?????.
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?? ?? ?? | (FCCP ?? ? ?? ?? ??) – (???????? ?? ???*) |
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* ???????? ?? ??? | Rotenone/antimycin A ?? ? ?? ?? ?? |
??: Substrate Oxidation Stress Test ??? ????? ?? ??? ???? XF ?? ?????? ???? ?? ???? ??? ????? ????? Add Widget(?? ??) > XF Cell Mito Stress Test ?? ???? ??? ??? ????(?: ??? ??, ATP ?? OCR, ?? ?? ?? ? ? ??????? OCR ?)? ???? XF Cell Mito Stress Test ??? ???? ?? XF Cell Mito Stress Test ??? ????? ??? ? ????. |
3. Assay Kit Companion Analysis View(??? ?? ???? ?? ??) ? XF Cell Energy Phenotype Test(XF ?? ??? ??? ???): ?? ?? ???? XF ?? ??? ??? ??? ??? ????? ???? ?????:
- Add View(?? ??) ??? Assay Kit Companion View(??? ?? ?? ??) ??? ???? ?? ??? ?????.
- XF Cell Energy Phenotype(XF ?? ??? ??? ???) ?? ??? ???? ??? ???? ??? ?????.
- ?? ??? ??? ??? ???? ??? ?????. ?? ??? ??? ???? ?? ??? ?????? ?????.
- ??? ?? group list(?? ??)?? ??? ??/?? Add View(?? ??)? ?????.
??? ???? | ?? |
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????? ECAR | ? ?? ?? ? ??? ECAR ?? ?? |
???? OCR | ? ?? ?? ? ?? OCR ?? ?? |
???? ECAR | ? ?? ?? ? ?? ECAR ?? |
??? ???(OCR) | (???? OCR/????? OCR) × 100% |
??? ???(ECAR) | (???? ECAR/????? ECAR) × 100% |
4.2. Assay Kit Companion Analysis View(??? ?? ???? ?? ??) ? XF Real-Time ATP Rate Assay(XF Real-Time ATP ??? ???): ?? ?? ???? XF Real-Time ATP ??? ??? ????? ???? ????? ?? ??? ????. ? ?? ??? ? ?? ??? ??? ??? ?? ??? ????? buffer factor? ???? ???? ???.
- Add View(?? ??) ??? Assay Kit Companion View(??? ?? ?? ??) ??? ???? ?? ??? ?????.
- XF ATP ??? ??? ?? ??? ???? ??? ???? ??? ?????.
- ?? XF ATP ??? ???(oligomycin ? rotenone/antimycin A? ?? ?? ? 1? ?? 2? ??)? ??, ? ?? ??? ????? ?? ?? ??? ???? ??? ???? oligomycin ??? ?? 2??, ?? 3?? ???? ???. ? oligomycin ?? ??? ??? ????? ???? ???? ? ??? ??? ??, ???? ?? oligomycin ??? ???? ?? ?? ? ???? ???? ?? ???. ? ? ????? ?? ??? ??? XF Real-Time ATP ??? ??? ?? ???? ?????.
- ?? ??? ??? ??? ???? ??? ?????. ?? ??? ??? ???? ?? ??? ?????? ?????. ??? ???? ???? ??? ??? ????? ???? ? ??? ?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ? ??? ?????.
- ??? ?? group list(?? ??)?? ??? ??/?? Add View(?? ??)? ?????.
a. Add Widget(?? ??) ??(???? ??? ????? ??)? ?????.
b. XF ATP Rate Assay widget list(XF ATP ??? ??? ?? ??)? ???? ??? ??? ??? ? Add Widget(?? ??)? ?????.
??: ?? XF ATP ??? ???(oligomycin ? rotenone/antimycin A? ?? ?? ? 1? ?? 2? ??)? ??, ? ?? ??? ???? ?? ?? ?? ??? ???? ??? ???? oligomycin ??? ?? 2?? ?? 3?? ???? ???. ? oligomycin ?? ??? ??? ????? ???? ???? ? ??? ??? ???. ???? ?? Oligomycin ??? ???? ?? ??? ???? ???? ????.
?? XF Real-Time ATP ??? ???
??? ???? | ?? |
---|---|
mitoATP ???(??) | [(? ?? ?? ? ??? OCR ?? ?? - oligomycin ?, Rot/AA ?? ? ?? OCR ?? ??) x 2 x (P/O)] |
glycoATP ???(??) | ? ?? ? ??? glycoPER ?? |
? ATP ???(??) | (mitoATP ???) + (glycoATP ???) |
XF ATP ??? ??(??) | (mitoATP ???) / (glycoATP ???) |
?? XF Real-Time ATP ??? ???:
??? ???? | ?? |
---|---|
mitoATP ???(??) | [(? ?? ?? ? ??? OCR ?? ?? - oligomycin ?, Rot/AA ?? ? ?? OCR ?? ??) x 2 x (P/O)] |
glycoATP ???(??) | ? ?? ? ??? glycoPER ?? |
? ATP ???(??) | (mitoATP ???) + (glycoATP ???) |
XF ATP ??? ??(??) | (mitoATP ???) / (glycoATP ???) |
mitoATP ???(??) | (?? ?? ?? ?, oligomycin ?? ? ?? OCR ?? ??) - (??? ? ? Rot/AA ?? ? ?? OCR ?? ??)] x 2 x (P/O) |
glycoATP ???(??) | ?? ?? ?? ? ? ?? ?? ?? glycoATP ??? ?? ??. |
? ATP ???(??) | mitoATP ???(??) + glycoATP ???(??) |
XF ATP ??? ??(??) | mitoATP ???(??) / glycoATP ???(??) |
5.3. Assay Kit Companion Analysis View(??? ?? ?? ?? ??) ? XF T Cell Activation Assay(XF T ?? ??? ??): ?? ?? ???? XF T ?? ??? ?? ????? ???? ?????:
- Add View(?? ??) ??? Assay Kit Companion View(??? ?? ?? ??) ??? ???? ?? ??? ?????.
- XF T Cell Activation Assay(XF T ?? ??? ??) ?? ??? ???? ??? ???? ??? ?????.
- Baseline(?????) ???? ???? ? ??? ???? PER ???? ??? ?? ? ??? ?? ??? ????? ?? ??? ???(%)? ?????. ??? ???? ?? Baseline(?????) ???? ???? ?? ??? ?? (pmol/?) ??? PER? ?????.
- Activator Injection(??? ??) ???? ???? ??? ?? ??? ?????? ?????.
- ?? ??? ??? ??? ???? ??? ?????. ?? ??? ??? ???? ?? ??? ?????? ?????.
- ??? ?? group list(?? ??)?? ??? ??/?? Add View(?? ??)? ?????.
c. Add Widget(?? ??) ??? ?????(???? ??? ????? ??).
d. XF T ?? ??? ??? ???? ??? ??? ??? ? Add Widget(?? ??)? ?????.
??? ???? | ?? |
---|---|
T ?? ??? | ??? ???? ??? ??? ???(PER) ??? |
?? ?? | ??? ?? ?? 2-DG ?? ?? ?? ?? ???? ???? ??? ?? ?? ?? ?? ?????? Seahorse Analytics?? ?????. ? ?? ???? ?? ??? ??? ??? ?????. H. J. Motulsky, "Exponential plateau", GraphPad Curve Fitting Guide. Accessed 20 May 2020. |
??? ?? ?? | ??? ?? ?? 2-DG ?? ?? ?? ?? ???? ???? Seahorse Analytics?? ?????. AUC ??? ????? ?? ?? ?? ?????. ? ?? ???? ?? ??? ??? ??? ?????. H. J. Motulsky, "How to: Area under the curve", GraphPad Statistics Guide. Accessed 20 May 2020. |
6.4. Assay Kit Companion Analysis View(??? ?? ?? ?? ??) ? XF Glycolytic Rate Assay(XF ?? ?? ???): ?? ?? ???? XF ?? ?? ??? ????? ???? ????? ?? ??? ????. ? ?? ??? ? ?? ??? ??? ??? ?? ??? ????? buffer factor? ???? ???? ???.
- Add View(?? ??) ??? Assay Kit Companion View(??? ?? ?? ??) ??? ???? ?? ??? ?????.
- XF Glycolytic Rate Assay(XF ?? ?? ???) ??? ???? ??? ???? ??? ?????.
- ?? XF ?? ?? ???(rontenone/antimycin A ? 2-DG? ?? ?? ? 1? ?? 2? ??)? ??, ?? ?? ??? ???? ??? ???? Rotenone/Antimycin-A ??? ???? ? ?? ??? ??? ? ????. ? Rotenone/Antimycin-A ?? ??? ??? ????? ???? ???? ? ??? ??? ???. ???? ?? Rotenone/Antimycin-A ??? ???? ?? ?? ? ???? ???? ?? ???. ? ? ?? ????? ?? ??? ??? XF ?? ?? ??? ??? ???? ?????.
- ?? ??? ??? ??? ???? ??? ?????. ?? ??? ??? ???? ?? ??? ?????? ?????. ??? ???? ???? ??? ??? ????? ???? ? ??? ?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ? ??? ?????.
- ??? ?? group list(?? ??)?? ??? ??/?? Add View(?? ??)? ?????.
a. Add Widget(?? ??) ??(???? ??? ????? ??)? ?????.
b. XF ?? ?? ??? ?? ??? ???? ??? ??? ??? ? Add Widget(?? ??)? ?????.
??: ?? XF ?? ?? ???(rontenone/antimycin A ? 2-DG? ?? ?? ? 1? ?? 2? ??)? ??, ?? ?? ??? ???? ??? ???? Rotenone/Antimycin-A ??? ???? ? ?? ??? ??? ? ????. ? Rotenone/Antimycin-A ?? ??? ??? ????? ???? ???? ? ??? ??? ???.???? ?? Rotenone/Antimycin-A ??? ??? ?? ?? ? ???? ???? ?? ???.
?? XF ?? ?? ???
??? ???? | ?? |
---|---|
?? ???? | ? ?? ? ??? glycoPER ?? |
?? ??? ???(PER)* | ? ?? ? ??? PER ?? |
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* ? ????? Seahorse Analytics?? ????? ???? ?? ?? ??? ???? ?? ???? ? ???? ?????. |
?? XF ?? ?? ???
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?? ???? | ? ?? ? ??? glycoPER ?? |
?? ??? ???(PER)* | ? ?? ? ??? PER ?? |
?????? ?? % PER(??) | (?? ????) / (?? PER) x 100% |
??? ???? | Rot/AA ?? ? ?? glycoPER ?? |
?? ???? | ?? ??? ?? ? ? Rot/AA ?? ?? glycoPER ?? ?? |
?? PER* | ?? ??? ?? ?? ?? ?? ?? PER ?? ?? |
?????? ?? % PER(??) | (?? ????) / (?? PER) x 100% |
* ? ????? Seahorse Analytics?? ????? ???? ?? ?? ??? ???? ?? ???? ? ???? ?????. |
???? ??? ?? ??? ??: ??? ?? ???? ??? ???? ??? ????? ??? ? ? ???? ?? ??? ??? ???. ?? ??? ?? ???? ??? ???? ??? ??? ? ?? ??? ??? ????. ? ??? ???? ?? ?????? ?? ???? ?? ?????. ?, ?? ??? ???? ??? ??? ?? ???? ????? ?????.
? ??? ?? ??? ?? ??? ?? ??? ??? ?????, ???? ?? ???, ?? ??? ?? ???? ??? ?? ? ?? ?? ??? ??? ?? ??? ?????. ??? ??? ?? ???? ??? ?? ??? ??? ??? ?? ??? ?????. ??? ???? ?? ???? ?? ???? ??? ?? ??? ?? ?? ? ??? ????? ?? ??? ?? ????? ??? ? ????. ?? ??? ?? ???? ??? ?? ??? ?? ?? ?? ? ?? ???? ?????. ?? ??? ? ? ???? ?? ????? ?? ??? ?? ???? ????? ?? ? ????. ???? ??? ?? ??? ?? ?? ??? ???? ?? ???? ????. ??? ????? ?? ??? ???? ?? ???? "Control" ??? ?? ?? ??? ???? ?????. Buffer Factor ?????? ?? ????? ??? ?? ???? ??? ??? ????? ?? ?? buffer factor? ???? ????. ? ??? Seahorse Analytics(?: XF T ?? ??? ??)? ?? ??? ?? ?? ?? ??? ?? ???? ???? ???? ??? ???(PER)? ???? ? ?????. buffer factor? ??? ???? ?? ??? ?? ??? ?? ??? ????? ?? ?? ???? ?????(?? ??). buffer factor? ??? ?? ??? ?? ? ????? ?? ???? ???? ??? ?? ?/?? ?? ??? ? ? ????.
buffer factor ??? ???? ?? – ??? ??? ? ?? ?? ??? ??? ? ? ??? ?? ??? ???? ?? 1???? ?????. ??? ??? ?? ?? ??? ?? ?? ?? 3???? ?????.
- OK(??)? ???? ?? ?? ??? ????.
- Add View(?? ??) ??? Standard Views(?? ??) > Quick View(?? ??)? ???? OCR ??? ??? ??? ?????.
- ?? ???? Modify(??)(?? ??? ?? ?? ??? ??? ??? ?? ???)? ?????.
- Assay Media(??? ??) ?? ???? buffer factor? ??? ?? ?? ??? ?????? ?????. ??? buffer factor ?? ???? ??? Media Type(?? ??) ???? ??? ???? ??? Agilent Seahorse XF ??? ??? ??? ? ????.
Seahorse XF RPMI ? DMEM Medium, pH 7.4 ??? ?? ??? buffer factor? ???? ?????. ??? ?? ??? ??? ???? ??, ??? ?? ??? buffer factor? ???? ???.
- Background Buffer ?? ???? buffer factor? ????? ?? ?????? ?????. Seahorse XF RPMI ? DMEM Medium ??? ???? ?? Use Default BF(?? BF ??) ???? ???? pH 7.4? buffer factor ?? ???? ??????. ??? ?? ??? ??? ???? ??, ??? ?? ??? buffer factor? ???? ???.
- Groups(??) ?? ???? ??? ??? ? ??? ??? ?????? ?????.
- ???? Save(??)? ?????. ? ??? ??(?? ??)?? ?? ?? ??(?? ??)? ??? ??? ??? ? ????. ? ??? ??? ??? “?? ?? ?? ??? ?? buffer factor? ???? ???”?? ???? ?? ???? ?? ??? ???? ?? ?? ?? ?? ?????. cellanalysis.support@aozhou2n.com
5.3 ??? ??
??? ?? ??(??)? ??? ??(????)? ?? ? ??? ???? ??? ??? ?????, ?? ??? ?? ??? ? ????. Agilent Seahorse XF ???? ?? ? ??? ??? ??? ??? ????? ?????. Seahorse Analytics? ???? ?? ??? ???? ?? ????? ??? ? ????.
1. ?? ???? ?? Seahorse XF ???? ?? ?????. Seahorse Analytics?? ?? ? ???? 3?? ??? ?? ???? ??? ????.
?? ???(OCR): ? ? ??? ?? ???? ????? ???? ?? ??? ?? ?? ? ?????? ??? ?????. ???/?(pmol/?) ? ?? ??? ?????. ?? ???(OCR) ???? ??? ?? ?????. ?? ???(OCR) ???? ?? ??(??? ??)? ?????. ?? ?? ??? ???? ?? ??? ??? ???? ???? ????? ???? ??? OCR???.
??! ???? ?? ?? ????? ?? (XFe96, XFe24, XFp, XF HS Mini)? ???? ?? OCR ??? ??? ??? ????.
- ????? ?: 37°C?? 0 ± 20(pmol/?)
- ??? ?: ????? ??? ?? 37°C?? 20-160 / 50-400(pmol/?).
?? ? ????(ECAR): ?? ??? ?? ?? ? ?? ? ??? ??? ????? ??? ???, milli-pH/?(mpH/?) ? ???? ?????. ?? ? ????(ECAR) ???? ?? ??? ?????(??? ??). ??? ??? ?? Rate(??) ???? ?? ???? ???? ??? ??? ?? ??? ??? ECAR ???? ??? ? ????.
??! ???? ?? ? ????? ?? (XFe96, XFe24, XFp, XF HS Mini)? ?? ECAR ???? ?? ??? ??? ????.
- ????? ?: 37°C?? 0 ± 10(mpH/?)
- ??? ?: ????? ??? ?? 37°C?? 10-90 / 20-120(mpH/?).
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5.4 ??? ?? ??
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5.2 ??? ??
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5.5 XF Report Generator
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- Windows PC? Microsoft Excel 2010, 2013 ? 2016.
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XF Report Generator - ???? ??? | ?? ?? ?? | ?? ?? ?? |
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Seahorse XF ?? ??? ??? ??? | ?? ?? ??? ??? | ?? ?? ??? ??? |
Seahorse XF ?? ?????? ???? ?? | ?? ?? ??? ??? | ?? ?? ??? ??? |
Seahorse XF Real-Time ATP ??? ??? | ?? ?? ??? ??? | ???? ?? |
Seahorse XF ?? ?? ??? | ?? ?? ??? ??? | ?? ?? ??? ??? |
Seahorse XF Mito Fuel Flex Test | ?? ?? ??? ??? | ???? ?? |
Seahorse XF ???? ???? ?? | ?? ?? ??? ??? | ???? ?? |
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6.1 XF ?? ? ??
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6.2 XF ?? ??? ???? ?? ??? ? ??
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?????? ??? ?? ??? ?? ? ?? ?? ??? ?????. Agilent Seahorse XF ?? ?????? ???? ??? ?? ?????? ????? ????? ?????. ??? ??? ??? ???? ??? ?? ?? ??? ???? ?? ??? ?? ?? ??? ???? ???? ?? ??? ??? ??? ? ????. ?? ??? ???? ???? ????? ?????? ??? ????, XF ???? ???? ??? ??????? ??? ?? ??? ?? ??? ??? ?? ???? ?? ???? ??? ? ?? ???? ???? ?????. ??? ??? ?, ??? ?? ? ??????? ?? ?? ?? ???? ?? ??? ??? ??????? ??? ? ? ?? ??? ?????. XF Plasma Membrane Permeabilizer (PMP)? ?????? ?? ???? ??? ???? ?? ?? ??? ????? ??? ?????. ? ??? ??? ?????? ?? ???? ?? ??? ?? ?? ?? ??? ??? ? ??? ??? ??? ???.??? ??????
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