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一種評估細胞代謝的創新方法——安捷倫 Seahorse XF 底物氧化檢測

什么是能量代謝?

新陳基礎排泄,是寶寶最一般的特性最為,神經細胞膜從間接攝食營養豐富物質,例如碳水氧化物、脂肪含量、球氨基酸、氫化物發生器成分、水及維他命等,一并 人體分析消除將在這其中蘊蓄的無機化學能宣泄出了有效的轉化為組織安排和細胞膜能能利于的激光電量,再確認利于這部分激光電量來保持日常的寶寶工作。我國把本身新陳基礎排泄的過程里面存于的激光電量的宣泄、吸收和利于稱是激光電量新陳基礎排泄。 氫燃料被稱做 21 血體人體細胞膜,充當制成寶寶體最基本上的組成部分和功用行業,對其功用的設計分析,打比方血體人體細胞膜的繁衍,兩極分化等,還可以為好幾個設計分析行業可以提供有社會價值的的信息,以其腸癌、抗體功用阻礙、心力管發病、感覺神經退行性發病等。在之前式的多個年終,呈流露出更多軟文及數據分析,描述力量分解是怎樣蘋果支持血體人體細胞膜動物學的個個幾個方面,以其分解的變是怎樣影晌最重要的血體人體細胞膜功用。

安捷倫 Seahorse XF 技術,作為目前細胞能量代謝檢測的金標準,可以在不侵入,不破壞樣本的前提下,實現實時、高通量、多樣本來源的活細胞能量代謝檢測,從而為評估細胞功能及研究代謝機制,提供了強有力的技術手段。除了細胞樣本,安捷倫 Seahorse XF 技術可以支持多種類型的樣本檢測,包括新鮮的組織切片,微生物,模式動物等等。

情況下新冠狀新冠病毒有哪些席卷,目前面對新冠病毒有哪些的役苗及文字特效藥的產品開發也在分秒必爭的實行中,安捷倫 Seahorse 技術水平一同就可以為抗新冠病毒有哪些藥物和役苗的產品開發尊定本體論基本條件。我都已經 在前面幾篇款型經典文章(具體的請參考結尾處高性價比閱讀文章)中間紹了安捷倫 Seahorse 保駕護航抗新冠病毒有哪些探討的有關東西。

為什么要研究細胞底物氧化水平?

體體神經細胞熱量分泌與幾種病毒息息各種相關,因而,好多鄰域的設計人員管理都對設計熱量分泌造成了強大的愛好,進來認識并了解到在分泌方式中實現體體神經細胞熱量需要量所依賴性的助燃劑當上了其中一個必要的設計路徑。大家公認,生物制品體所必需的兩大菅養元素為油脂、糖元和核營養素,我們對體體神經細胞認為,長鏈油脂酸(LCFA),夏黑葡萄糖水(glucose)/異丙醇酸(pyruvate)和谷氨酰胺(glutamine)是提拱熱量的兩種最具體的底物。 諸多層面(舉例腸癌、免疫組織組織力學、干體上皮人體神經元微生態學)的設計技術師就已經 材料一種底物的腐蝕品質會對體上皮人體神經元人的命運、模塊包括應用性所產生之深導致。腸癌設計技術師對設計癌體上皮人體神經元對待底物的根據性很感濃厚學習興趣,最喜歡見的是癌體上皮人體神經元對待谷氨酰胺的根據[1,2],一種根據性就能夠呈現癌體上皮人體神經元的要害,于是為發現腫瘤藥物靶點提供了法律依據;免疫組織組織力學設計技術師則對設計介導免疫組織組織力體上皮人體神經元分裂和重置的底物感濃厚學習興趣,最喜歡見的是脂肪細胞酸腐蝕[3]。 有很多探析出現 不止能能展示了新的生物工程學感悟,況且還探求了監測和研發取得成功診治的新的辦法。免疫抗體性性基礎消化吸收探析研究方向領軍隊干部才小人物 Dr.Erika L. Pierce 的專業團隊投稿在 Trends in Immunology 上的綜述論文性散文[4] 還是那么其中一個好例子。在論文中,他倆著重于挑選了完成監測 T 生殖神經腫瘤組織受損受損內部核系基礎消化吸收(是指人體油脂酸防氧化反應)得以診治癌癥復發和免疫抗體性性重大疾病的繁多的辦法,為現在最火的免疫抗體性性診治能能展示了必要遵循原則。散文說到基礎消化吸收重編譯程序在 T 生殖神經腫瘤組織受損受損內部核系成功激活和職能是肯定的,詞有管控安基酸的轉運公司,能能上限作用 T(effector T)生殖神經腫瘤組織受損受損內部核系的擴張;管控人體油脂酸的合成圖片,能能暗改 Th17 生殖神經腫瘤組織受損受損內部核系的差異性但會帶動會調接器性 T 生殖神經腫瘤組織受損受損內部核系(Treg)的進展方向;增進人體油脂酸防氧化反應能能帶動會調接器性 T 生殖神經腫瘤組織受損受損內部核系又或者記住 T 生殖神經腫瘤組織受損受損內部核系(T memory)的進展方向。以至于,監測 T 生殖神經腫瘤組織受損受損內部核系的基礎消化吸收是提高自己靶點 T 生殖神經腫瘤組織受損受損內部核系職能的其中一種的辦法。 下次看1篇種類于腫瘤復發鉆研范圍,2019 年說出在 Nature Metabolism 上的一篇文章內容。意大利貝勒醫學界院的科學技術家蘊含了靠前腺癌,這樣的常用于中中年男孩子泌尿生殖中心平臺腫瘤復發分類的遭受措施,里面有個部分靠前腺癌與雄性荷爾蒙排泄絮亂關與[5]。一篇文章內容中拇指出雄荷爾蒙蛋白激酶驅程的靠前腺癌體組織需提交的能量轉換種類依耐于線粒體二甲苯酸氧化的反應,里面 Seahorse 信息證明了能夠抑制作用擔任將二甲苯酸集運到線粒身體的集運子(MPC),可不可以有用能夠抑制作用體組織的氧化的反應磷過酸的水平,蘊含了這樣的癌體組織的底物進行措施,關鍵在于建議 MPC 將是這樣的靠前腺癌的不確定控制靶點。

如何檢測細胞底物氧化水平 ?

前期.我已是了解了科學實驗神經神經血組織核相對于底物鈍化依賴癥關系的最至關重要,安捷倫 Seahorse 因而保證一堆套完全的監測最簡單的措施,可使用測評活神經神經血組織核的耗氧傳送速度(OCR)轉變 來公測神經神經血組織核底物的鈍化技術。等高速 而對模本無侵犯擠壓傷的監測最簡單的措施使科學實驗人要能科學實驗神經神經血組織核如何才能鈍化以下幾種包括的底物:長鏈多余脂肪酸,匍萄糖/異丙醇酸和谷氨酰胺。根據相應底物鈍化徑路的促使劑,依照 Seahorse XF 線粒體學習壓力公測,能否對線粒體基本能力實施全方面測評,在底物需要量較少(即基本知識氣息)和底物需要量較多(即非常大氣息)的能力下科學實驗神經神經血組織核基本能力,這其中在底物需要量較多時神經神經血組織核非常多地依賴癥關系相應底物(圖 1)。

該測定方法基于已被廣泛熟知并認可的 Seahorse XF 線粒體壓力測試,可提供直觀的功能性參數,非常適合研究細胞在基礎條件下以及在壓力狀態下能否升高對底物的需求,從而對細胞底物的偏好性以及依賴性進行全方面評估。使用這些試劑盒能夠更方便快速的研究活細胞中特定底物的氧化過程,從而有助于研究細胞如何轉換對于特定底物的依賴,以執行關鍵的細胞功能。

圖 1. 安捷倫 Seahorse XF 底物氧化壓力測試曲線。在添加或不添加抑制劑時,連續添加化合物,測定基礎呼吸參數、對抑制劑(Etomoxir、UK5099 或 BPTES)的急性響應以及最大呼吸參數。值得注意的是,雖然在基礎條件下可以檢測到較小的變化,即急性響應,但在高底物需求條件下(如 FCCP 的加入),往往會出現更大的響應,從而顯示出細胞氧化所研究底物的能力的差異。

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參考文獻

1. Hensley CT, et al., Glutamine and cancer: cell biology, physiology, and clinical opportunities. J Clin Invest. 2013;123(9):3678–3684.

2. Wang Q, et al., Targeting ASCT2-Mediated Glutamine Uptake Blocks Prostate Cancer Growth and Tumour Development. The Journal of Pathology. 2015;236(3):278–289.

3. Patsoukis N, et al., PD-1 alters T-cell metabolic reprogramming by inhibiting glycolysis and promoting lipolysis and fatty acid oxidation. Nature Communications. 2015;6(6692). doi: 10.1038/ncomms7692.

4. David O’Sullivan and Erika L. Pearce, Targeting T cell metabolism for therapy. Trends Immunol. 2015 February ; 36(2): 71–80.

5. Bader et al., Mitochondrial pyruvate import is a metabolic vulnerability in androgen receptor-driven prostate cancer. Nat Metab. 2019 January ; 1(1): 70–85.

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