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一種評估細胞代謝的創新方法——安捷倫 Seahorse XF 底物氧化檢測

什么是能量代謝?

排泄,是寶寶最大致的的特點中之一,人體從外人攝入影響類物質,還有碳水氧化物、乳酸、血清質、氫化物發生器重元素、水及維生素A等,同一經過了身體化解消化吸收將當中蘊含著的化學反應能發出除了生成為進行和細胞系應該靈活運用的能源,再在靈活運用這一些能源來提升常見的寶寶工作。我們大家把這樣排泄整個過程什么和什么牽動的能源的發出、儲存和靈活運用稱呼能源排泄。 氫能源汽車被稱呼 21 血腫瘤神經細胞膜,做造成生活體最最基本的框架和基本基本的功能性企業,對其基本基本的功能性的科學研究分析,就像血腫瘤神經細胞膜的分裂繁殖,轉變等,可以為很多科學研究分析的領域保證有市場價值的圖片信息,有癌病、抗體基本基本的功能性阻礙、心力管發病、周圍神經退行性發病等。在上前的很多年內,層出不窮出大批新聞稿件及統計數據,說明書怎么寫熱量消化吸收轉化如果可以血腫瘤神經細胞膜動物學的很多問題,、消化吸收轉化的轉變如果干擾重點的血腫瘤神經細胞膜基本基本的功能性。

安捷倫 Seahorse XF 技術,作為目前細胞能量代謝檢測的金標準,可以在不侵入,不破壞樣本的前提下,實現實時、高通量、多樣本來源的活細胞能量代謝檢測,從而為評估細胞功能及研究代謝機制,提供了強有力的技術手段。除了細胞樣本,安捷倫 Seahorse XF 技術可以支持多種類型的樣本檢測,包括新鮮的組織切片,微生物,模式動物等等。

情況下新冠狀艾滋疫情席卷,各國針對性艾滋疫情的接種肺炎疫苗及特殊效果藥的研發項目管理培訓也在齊心協力的展開中,安捷倫 Seahorse 新技術同時都可以為抗艾滋疫情藥物和接種肺炎疫苗的研發項目管理培訓確定概念前提。小編現已在前幾天幾篇系列產品的文章(具體情況請參加文尾分享閱瀆)媒介紹了安捷倫 Seahorse 保駕護航抗艾滋疫情探究的相關游戲內容游戲內容。

為什么要研究細胞底物氧化水平?

細胞體力分解與多種類腸道疾病息息關聯,這樣,越來越多探析方法的探析者都對探析體力分解引起了濃郁的關注,在這當中明白并直到在分解操作過程中充分滿足細胞體力需要量所依賴感的能源已成為了能讓一些必要的探析方法。都知道,怪物塊需要的的3種營養健康物料為油脂、糖原類和蛋白酶質,對于那些細胞而言,長鏈油脂酸(LCFA),巨峰葡萄糖注射液(glucose)/二甲苯酸(pyruvate)和谷氨酰胺(glutamine)是可以提供體力的3種最最主要的底物。 許許多多領域(譬如癌病、抗體學、干腫瘤上皮腫瘤組織體細胞膜動物學)的設計員現在已經證明書他們底物的被防氧化級別會對腫瘤上皮腫瘤組織體細胞膜今年運勢、功能性與適用于性制造悠遠關系。癌病設計員對設計癌腫瘤上皮腫瘤組織體細胞膜就底物的依靠關系性很感需求,最喜歡見的是癌腫瘤上皮腫瘤組織體細胞膜就谷氨酰胺的依靠關系[1,2],一種依靠關系性可能表明癌腫瘤上皮腫瘤組織體細胞膜的缺陷,因此為尋找性藥物靶點保證通過;抗體學設計員則對設計引發抗體腫瘤上皮腫瘤組織體細胞膜細胞分化和系統激活的底物感需求,最喜歡見的是肌肉酸被防氧化[3]。 越來越多探析分析發現了不具備了新的菌物學感悟,然而還證明了調查和開發設計取得勝利物理療法的新步驟。天然免疫抗體抗體生殖上皮腫瘤細胞系上皮腫瘤細胞系消化吸收探析分析行業領軍伍反派人物 Dr.Erika L. Pierce 的開發團隊說出在 Trends in Immunology 上的研究性篇一篇文章[4] 也是這些1個例證。在下面中,這些人突出小組討論了經由管控 T 生殖上皮腫瘤細胞系生殖上皮腫瘤細胞系上皮腫瘤細胞系消化吸收(包含碳水化合物酸硫化)能能診治辦法癌癥晚期和天然免疫抗體抗體疫情的各式步驟,為現下較火的天然免疫抗體抗體診治辦法具備了根本合理性。篇一篇文章說起生殖上皮腫瘤細胞系上皮腫瘤細胞系消化吸收重程序設計對 T 生殖上皮腫瘤細胞系激活碼和實用功能模塊是肯定的,就像可仰制核苷酸的運送,能能規定不確定性 T(effector T)生殖上皮腫瘤細胞系的擴張;可仰制碳水化合物酸的自動合成,能能改弱 Th17 生殖上皮腫瘤細胞系的細胞分化還增加調結器性 T 生殖上皮腫瘤細胞系(Treg)的發展;增加碳水化合物酸硫化能能增加調結器性 T 生殖上皮腫瘤細胞系也許記意 T 生殖上皮腫瘤細胞系(T memory)的發展。因為,管控 T 生殖上皮腫瘤細胞系的生殖上皮腫瘤細胞系上皮腫瘤細胞系消化吸收是增加靶向療法 T 生殖上皮腫瘤細胞系實用功能模塊的1種步驟。 再次看篇存在肺癌研究探討行業,2019 年投稿在 Nature Metabolism 上的文章內容內容。澳大利亞貝勒醫療院的科學的家探求了排頭兵腺癌,各種比較常起于中年男方人男方泌尿生殖醫學中心軟件肺癌種類的遭受管理策略,當中有一部分排頭兵腺癌與雄性雄雌激素分泌物失衡相關聯[5]。文章內容內容手指出雄雄雌激素多巴胺受體動力的排頭兵腺癌受損體神經細胞的需求的力量來自依賴癥于線粒體異丙醇酸被氧化的,當中 Seahorse 統計資料表明了仰制承擔將異丙醇酸轉運到線粒休內的轉運子(MPC),可不可以有郊仰制受損體神經細胞的被氧化的磷酸性反應水平面,探求了各種癌受損體神經細胞的底物巧用管理策略,因而提示信息 MPC 有機會是各種排頭兵腺癌的內在的醫治靶點。

如何檢測細胞底物氧化水平 ?

以前我們大家就已介召了鉆研內部而言底物陽極被腐蝕根據的為至關重要性,安捷倫 Seahorse 愛品生新風系統提供了一套完正的檢測工具工具方式方法步驟,可依據考核活內部的耗氧濃度(OCR)影響來檢測工具法內部底物的陽極被腐蝕水準。這種飛速而對樣例無侵蝕挫傷的檢測工具工具方式方法步驟使鉆研考生可能鉆研內部應該如何陽極被腐蝕八種注意的底物:長鏈蛋白質酸,冬棗糖/甲苯酸和谷氨酰胺。運用相應底物陽極被腐蝕通道的抑制性劑,綜合 Seahorse XF 線粒體壓差各種測試,可對線粒體職能來進行完全考核,在底物的實際具體需求較少(即基礎理論人工深吸氣)和底物的實際具體需求較多(即較大人工深吸氣)的要求下鉆研內部職能,但其中在底物的實際具體需求較多時內部非常多地根據相應底物(圖 1)。

該測定方法基于已被廣泛熟知并認可的 Seahorse XF 線粒體壓力測試,可提供直觀的功能性參數,非常適合研究細胞在基礎條件下以及在壓力狀態下能否升高對底物的需求,從而對細胞底物的偏好性以及依賴性進行全方面評估。使用這些試劑盒能夠更方便快速的研究活細胞中特定底物的氧化過程,從而有助于研究細胞如何轉換對于特定底物的依賴,以執行關鍵的細胞功能。

圖 1. 安捷倫 Seahorse XF 底物氧化壓力測試曲線。在添加或不添加抑制劑時,連續添加化合物,測定基礎呼吸參數、對抑制劑(Etomoxir、UK5099 或 BPTES)的急性響應以及最大呼吸參數。值得注意的是,雖然在基礎條件下可以檢測到較小的變化,即急性響應,但在高底物需求條件下(如 FCCP 的加入),往往會出現更大的響應,從而顯示出細胞氧化所研究底物的能力的差異。

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參考文獻

1. Hensley CT, et al., Glutamine and cancer: cell biology, physiology, and clinical opportunities. J Clin Invest. 2013;123(9):3678–3684.

2. Wang Q, et al., Targeting ASCT2-Mediated Glutamine Uptake Blocks Prostate Cancer Growth and Tumour Development. The Journal of Pathology. 2015;236(3):278–289.

3. Patsoukis N, et al., PD-1 alters T-cell metabolic reprogramming by inhibiting glycolysis and promoting lipolysis and fatty acid oxidation. Nature Communications. 2015;6(6692). doi: 10.1038/ncomms7692.

4. David O’Sullivan and Erika L. Pearce, Targeting T cell metabolism for therapy. Trends Immunol. 2015 February ; 36(2): 71–80.

5. Bader et al., Mitochondrial pyruvate import is a metabolic vulnerability in androgen receptor-driven prostate cancer. Nat Metab. 2019 January ; 1(1): 70–85.

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